實驗概要
本人總結的多糖提取前AIR制備過程
實驗步驟
AIR (alcohol insoluble residue)提取
1)新鮮收取的植物在蒸餾水中清洗以除去培養基等物質,后凍干。
2)將凍干的樣品在液氮中研磨成粉末。
3)AIR (alcohol insoluble residue)制備
浮萍、擬南芥葉及根中淀粉含量較高,需要先除去其中淀粉。擬南芥、楊樹、芒草等莖稈不需要除淀粉這一步。
Note:不同組織體積不一樣,一般液體是粉末體積的3-4倍 | ||||
80%乙醇 | 80oC | 1h | 1次 | 4000 g 5 min |
氯仿:甲醇=2:1 | 37oC | 2h | 2次 | 過濾 |
65% 乙醇 | 37oC | 30 min | 2次 | 4000 g 5 min |
80% 乙醇 | 37oC | 30 min | 2次 | 4000 g 5 min |
100%乙醇 | 37oC | 30 min | 2次 | 4000 g 5 min |
100%丙酮 | 37oC | 2h | 2次 | 4000 g 5 min |
70oC 真空干燥 | ||||
根據實驗室已有的淀粉降解法降解淀粉,加入5倍體積無水乙醇,4oC沉淀過夜,離心,常規干燥,即為AIR。 |
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