實驗方法原理
實驗材料 酶樣品
試劑、試劑盒 Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3[Fe(CN)6]
儀器、耗材 分光光度計
實驗步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
0.98 ml 實驗混合物
0.02 ml 酶樣品
30 ℃ 時吸收值于 436 nm 處下降,吸收系數 ε436=755 l/(mol·cm)。
注意事項
其他
試劑:
0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.6
0.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)
0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸鈉,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)
0.01 mol/L 二磷酸硫胺(ThDP,脫羧輔酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于 10 ml 水中)
0.1 mol/L K3[Fe(CN)6](Mr=329.2;330 mg 溶于 10 ml 水中)