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  • 發布時間:2020-08-17 17:38 原文鏈接: 丙酮酸脫氫酶(硫辛酰胺)的測定

    實驗方法原理

    實驗材料 酶樣品

    試劑、試劑盒 Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3[Fe(CN)6]

    儀器、耗材 分光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    0.98 ml 實驗混合物


    0.02 ml 酶樣品


    30 ℃ 時吸收值于 436 nm 處下降,吸收系數 ε436=755 l/(mol·cm)。


    注意事項

    其他

    試劑:


    0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.6


    0.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)


    0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸鈉,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)


    0.01 mol/L 二磷酸硫胺(ThDP,脫羧輔酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于 10 ml 水中)


    0.1 mol/L K3[Fe(CN)6](Mr=329.2;330 mg 溶于 10 ml 水中)


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