基本方案
| 實驗方法原理 |
在酶測定中二氧化碳的釋放可以用壓力計或 14C1-丙酮酸鹽測定。在此將描述一個與ADH 有關的實驗。
|
|---|---|
| 實驗材料 | 酶樣品 |
| 試劑、試劑盒 | 檸檬酸緩沖液 丙酮酸 焦磷酸硫胺素 MgCl2 NADH ADH |
| 儀器、耗材 | 分光光度計 |
| 實驗步驟 |
實驗所需「試劑」具體見「其他」 0.98 ml 實驗混合物
0.02 ml 酶樣品 記錄 340 nm、25℃ 處吸光值的減少，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。
展開 |
| 注意事項 | |
| 其他 |
試劑： 0.2 mol/L 檸檬酸緩沖液，pH 6.0 1 mol/L 丙酮酸（丙酮酸鈉，Mr＝110.0；1.1 g 溶于 10 ml H2O） 0.01 mol/L 焦磷酸硫胺素（ThDP，脫竣輔酶，Mr＝460.8；46.1 mg 溶于 10 ml H2O） 0.1 mol/L MgCl2（MgCl2·6H2O，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml H2O） 0.01 mol/L NADH（二鈉鹽，Mr＝709.4；71 mg 溶于 10 ml H2O） ADH 來自酵母（20 mg/ml）
展開 |
