于月經周期的第四周進行乳頭溢液體標本采集。
采集標本前應進行乳房觸診，檢查有無腫塊及腫塊位置，然后冼凈乳頭，擦干。若采集微生物培養標本尚須將乳頭和乳暈部消毒后以無菌操作收集乳頭溢液。若溢液較多，應以無菌紗布拭去最初的少量溢液，收集新分泌的溢液：
（1）自然溢出液：根據檢驗目的直接收集于載玻片上，制備涂片或接種于培養基內即可。若溢液較豐富，亦可收集于小離心管內，經離心處理后取沉淀物涂片或接種培養。
（2）有腫塊乳腺分泌物自腫塊的遠乳頭側順導管引流方向用手輕按摩和擠壓，則集分泌物。
（3）無腫塊乳腺分泌物可沿乳暈周圍輕輕做向心性按摩擠壓，采集分泌物。
（4）刮片或印片：乳頭或乳房其它部位有糜爛、潰瘍或瘺管口者，先拭去表面的腐爛壞死組織，再用小刮板刮取病理分泌物涂片，也可用消毒干燥的載正好片在病損部位輕壓印片進行檢查。