鑒別
(1)取本品的內容物適量(約相當于鹽酸二甲雙胍50mg),加水10ml,振搖使鹽酸二甲雙胍溶解,濾過,取續濾液2m1,加10%亞硝基鐵氰化鈉溶液-鐵氰化鉀試液-10%氫氧化鈉溶液(等體積混合,放置20分鐘使用)10ml,3分鐘內溶液呈紅色(2)取含量測定鹽酸二甲雙胍項下的供試品溶液,照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定,在233nm的波長處有最大吸收。(3)在含量測定格列本脲項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。(4)取鑒別(1)項下的濾液,應顯氯化物鑒別(1)的反應(通則0301)
檢查
有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品30粒的內容物,研細,精密稱取適量(約相當于鹽酸二甲雙胍50mg),置100ml量瓶中,加流動相適量,超聲約5分鐘使鹽酸二甲雙胍溶解,放冷,用流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續濾液。雙氰胺對照品溶液取雙氰胺對照品適量,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液三聚氰胺對照品溶液取三聚氰胺對照品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液。對照溶液分別精密量取上述三種溶液各1ml,置同200ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻。色譜條件用磺酸基陽離子交換鍵合硅膠為填充劑;以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨17g,加水100oml溶解,用磷酸調節pH值至3.0)為流動相;檢測波長為218nm;進樣體積10l系統適用性要求對照溶液色譜圖中,理論板數按雙氰胺峰計算不低于5000,二甲雙胍峰與三聚氰胺峰之間的分離度應不小于10.0測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖至二甲雙胍色譜峰保留時間的2倍限度供試品溶液色譜圖中如有與雙氰胺保留時間一致的峰,按外標法以峰面積計算,不得過鹽酸二甲雙胍標示量的0.04%,如有其他雜質峰,單個雜質峰(保留時間在雙氰胺峰之后)的峰面積不得大于對照溶液中二甲雙胍峰面積的0.4倍(0.2%),其他各雜質峰(保留時間在雙氰胺峰之后)峰面積的和不得大于對照溶液中二甲雙胍峰面積的2倍(1.0%)。雜質Ⅰ與雜質Ⅱ照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取有關物質項下的細粉適量(約相當于格列本脲12.5mg),精密稱定,置25m量瓶中,加甲醇16ml,超聲約20分鐘并振搖使格列本脲溶解,放冷,用磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨1.725g,加水300m溶解,用磷酸調節pH值至3.5±0.05)稀釋至刻度,搖勻,離心,取上清液濾過,取續濾液對照品溶液取4-[2-(5-氯2-甲氧基苯甲酰胺)乙基]苯磺酰胺(雜質Ⅰ)對照品與4[2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰胺乙基]苯磺酰氨基-甲酸乙酯(雜質Ⅱ)對照品各適量,精密稱定,加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含雜質Ⅰ與雜質Ⅱ各0.3mg的溶液,精密量取1ml,置100ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以磷酸氫銨溶液(取磷酸二氫銨1.725g,加水300ml溶解,用磷酸調節pH值至3.5±0.05)-甲醇(30:50)為流動相;檢測波長為300nm;進樣體積20μl。系統適用性要求對照品溶液色譜圖中,雜質I峰與雜質Ⅱ峰之間的分離度應符合要求。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至格列本脲峰保留時間的2倍限度供試品溶液色譜圖中如有與雜質Ⅰ和雜質Ⅱ保留時間一致的色譜峰,按外標法以峰面積計算,均不得過0.6%。含量均勻度格列本脲取本品1粒,置50ml量瓶中加甲醇適量,超聲約20分鐘使格列本脲溶解,放冷,用流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續濾液作為供試品溶液。照含量測定格列本脲項下的方法測定格列本脲的含量,應符合規定(通則0941)。溶出度照溶出度與釋放度測定法(通則0931第三法)測定。溶出條件以0.02%三羥甲基氨基甲烷溶液250ml為溶出介質,轉速為每分鐘75轉,依法操作,經45分鐘時,取溶出液,濾過,續濾液備用。鹽酸二甲雙胍供試品溶液精密量取上述續濾液適量,用溶出介質定量稀釋制成每1ml中約含鹽酸二甲雙胍5μg的溶液。對照品溶液取鹽酸二甲雙胍對照品適量,精密稱定,加溶出介質溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5μg的溶液。測定法取供試品溶液與對照品溶液,照紫外-可見分光光度法(通則0401),在233nm的波長處分別測定吸光度,計算出每片中鹽酸二甲雙胍的溶出量。 限度標示量的80%,應符合規定格列本脲供試品溶液取上述續濾液。對照品溶液取格列本脲對照品約12.5mg,精密稱定,置50ml量瓶中,加甲醇適量,超聲約20分鐘使格列本脲溶解,放冷,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,精密量取1ml,置25ml量瓶中,用溶出介質稀釋至刻度,搖勻色譜條件見含量測定格列本脲項下。檢測波長為225nm。系統適用性溶液與系統適用性要求見含量測定格列本脲項下。測定法見含量測定格列本脲項下。計算出每片中格列本脲的溶出量限度標示量的75%,應符合規定其他應符合膠囊劑項下有關的各項規定(通則0103)。