人用疫苗雜質控制

　　新版中國藥典發布3309人用疫苗雜質控制技術指導原則，以20版藥典三部《人用疫苗總論》為基礎，基于我國已上市疫苗產品的雜質控制的實際經驗，參考ICH關于風險評估和全生命周期管理理念，從疫苗雜質來源，疫苗雜質控制的原則及策略，包括風險評估、全過程控制、全生命周期管理、不同類型疫苗雜質的控制要點，以及變更事項對疫苗雜質控制等各方面保證疫苗產品質量。賽默飛色譜與質譜針對傳統疫苗、重組疫苗和核酸疫苗提供全方位的研發及工藝質控。

　　工藝相關雜質

　　工藝相關雜質主要來源于生產用物料，包括生產過程中使用的起始物料，生產過程中引入的原材料，制劑所用輔料以及直接接觸藥品的內包裝材料的浸出物等。

　　1. 宿主細胞蛋白殘留物

　　隨著高分辨質譜技術性能的不斷提升，已具有高靈敏度和寬的定量動態范圍，以及蛋白質組學技術的飛速發展，可實現對未知蛋白質的高通量定性和定量。

　　采用賽默飛EASY nLC 1200與Orbitrap系列高分辨質譜儀聯用，UPS2中含有48種內標蛋白6個不同濃度，共鑒定其中24種，其實際含量結果如下表，含量范圍為0.05-444.88ppm，實際含量>1ng（10ppm）的16種內標蛋白全部鑒定到，實際含量在0.06-0.38ng（0.6-3.8ppm）范圍內共鑒定到6種，此方案的靈敏度足以滿足生物藥領域客戶的需求。

本次實驗中鑒定到UPS2內標蛋白的種類及其實際含量

　　2. 疫苗工藝及質量控制解決方案

　　裂解劑

　　在疫苗制備過程中加入裂解劑，如乙醚、聚山梨酸酯80、脫氧膽酸鈉等，以裂解病毒粒子，再經純化工藝去除部分病毒成分，以有效降低不良反應，如甲型肝炎滅活疫苗（人二倍體細胞）生產流程中提純工藝階段需用去氧膽酸鈉進行細胞裂解，疫苗中殘留去氧膽酸的含量不得高于20μg/mL。

　　新版美國藥典收錄CAD檢測器作為去氧膽酸殘留和有關物質的方法。CAD檢測器結合Acclaim Surfactant色譜柱，可同時對膽酸、去氧膽酸、熊去氧膽酸、豬去氧膽酸、鵝去氧膽酸和牛黃脫氧膽酸進行檢測，獲得高分離度、高靈敏度和重現性的結果。

　　培養基

　　牛血清白蛋白用于細胞培養，但它也是一種異種蛋白，殘留量偏高的情況下，多次使用能引發機體的過敏反應。藥典規定測定病毒類疫苗中殘余牛血清白蛋白的含量，應不超過50ng/劑。

　　采用MabPac SEC體積排阻色譜柱結合生物惰性液相Vanquish對牛血清白蛋進行了直接測定，無需衍生，能有效排除小分子的干擾，可以排除無/弱紫外吸收大分子輔料干擾（如吐溫、PEG等），適用于高鹽和寬pH范圍緩沖液，有效防止蛋白吸附。

　　佐劑檢測

　　鋁佐劑是最早使用的佐劑，也是目前唯一廣泛使用的疫苗佐劑，鋁佐劑具有便宜、安全、合成簡單的優點，但也存在易在體內蓄積、可能刺激I gE 產生、無法生物降解等問題。在疫苗成品中需對鋁含量進行檢測，如13 價肺炎球菌結合疫苗中鋁含量應為 0.15-0.35 mg/ml，吸附白喉疫苗中氫氧化鋁不得高于0.3mg/ml。

　　對于佐劑中Al含量進行檢測，AA、ICPOES和ICP-MS方法均具有極高的靈敏度，iCE3000系列AA優異的光學系統結構、高精度控溫和背景扣除技術，可將Al元素在石墨爐分析中的發射干擾有效去除；而iCAP Qnova系列ICP-MS專利技術的Q Cell碰撞池結合低質量數剔除技術，能夠將Al元素在質譜分析中的多原子干擾做到完全去除，這些技術的使用確保了佐劑中Al檢測獲得最佳的準確性和穩定性等方法學數據要求。

iCE 3000 系列原子吸收分析Al 標準曲線及吸收峰