結核菌素試驗是應用結核菌素進行皮膚試驗，測定機體對結核分枝桿菌是否有超敏反應的一種體內試驗方法。試驗的方法是將結核菌素或者是純蛋白衍生物，0.9%氯化鈉注射液稀釋成不同的濃度，取0.1毫升注射于前臂掌側皮內，48到72小時后檢查反映情況。
注射部位如果出現大于5毫米的紅腫硬結，就是陽性，直徑小于5毫米為陰性，陽性反應表明機體也感染過結核分枝桿菌或者接種過卡介苗，機體對結核分枝桿菌有免疫力，不一定患結核病，陰性反應表明未感染過結核分枝桿菌，如果是小孩兒應該接種卡介苗。
但是有以下情況也可能出現陰性反應，在感染初期，嚴重的結核病，但是細胞免疫功能低下，病人使用免疫抑制劑免疫功能受抑，也或者是患者為老年或體弱者。