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  • 發布時間:2020-08-17 14:20 原文鏈接: 從PEI沉淀洗脫σ32和RNA聚合酶實驗

    試劑、試劑盒 緩沖液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的緩沖液 A

    儀器、耗材 SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠

    實驗步驟

    材料與設備


    SDS-PAGE 電泳裝置


    聚丙烯酰胺小膠(10%)


    試劑


    緩沖液 A


    含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNaCl 的緩沖液 A


    (配方,見“試劑的配制”,PP.184~189)


    操作程序


    1)PEI 懸液(見 p.153) 于離心前取 6X50ul 等分試樣。各試樣用微型離心機離心 lmin, 然后用 50ul 分別含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNaCl 的緩沖液 A 重懸沉淀物。


    2) 充分混勻后靜置 10~15mi。再用微型離心機離心 lmin,取上清樣品,如需要,進行快速蛋白質斑點印跡試驗(見 pp.l72~173) 和 SDS-PAGE 電泳分析。


    結果


    典型的顯示 NaCl 洗脫實驗結果的 SDS 凝膠照片,見圖 3-5。


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