在顯微鏡中所使用的zui簡單的光源是日光,可以通過一個反光鏡把日光反射入顯徽鏡中。這種反光鏡一面是平面,一面是凹面,凹面反光鏡多用于較低的放大倍數。這種日光源是很容易被利用的。但是日光是一種散射光,它不能在物體平面上成像,并且會在物體上引起大量的閃光,從而會降低像的反差。當然在低倍觀察時使用孔徑光闌可以把這種閃光限制在一定的范圍之內,睛朗的白天在靠近窗戶處使用平面反光鏡往往可以得到滿意的照明。因此至今,在一些教學顯微鏡和用于觀察的一般顯徽鏡中仍然采用日光照明。
在現代顯微鏡中,特別是在奧林巴斯顯微鏡、攝影顯微鏡以及用于各種用途的其他特種顯徽鏡中,更多地采用人工光源即燈光照明。這是因為與日光照明相比,燈光照明光線均勻、亮度穩定,所有的條件都可以有效地控制。并且這種光源可以在物體上成像,減小散射,有效地提高像的反差。
對于人工光源的基本要求是:①具有足夠的照明亮度和足夠的單色光照明亮度,②具有足夠大的發光表面。
當然對于亮度和發光表面的要求實際上也不是太高的,亮度主要考慮到較高的放大倍數,較大的發光表面主要用于低倍的觀察。通過可變電阻或中密度濾光片就可以調節過高的亮度;光源的有效面積往往可以用視場光閡來調節,光源亮度上的不均勻性可用柯勒照明或在光源前加場玻瑞來克服。
實際上在光源的發光面積和亮度之間可以達到協調,這兩個因素并不是彼此孤立的。在一般顯微鏡中zui常使用的光源是40-60W的高壓白熾鎢燈,這種燈泡具有較大的發光表面和幾千個熙提的亮度,它們zui適于同較簡單類型的臨界照明器一起使用。與我們一般所想像的相反,在使用高倍觀察當像的亮度不足的情況下,應該使用40W的高壓燈泡而不是100W的高壓燈泡,這一點似乎是很難理解的。其實這種100W“強”光源的優越性只是增大了發光表面積,這種大表面積對于低放大倍數是有用的,但對于高放大倍數來說并不能增大亮度。此外,大功率的高壓燈泡發射相當數盆的熱能,這對于顯徽觀察毫無益處。
現在經常用于顯微鏡的是12V或6V的低電壓燈泡,這種燈泡具有15--m-60W或更高的功率,它們在緊密地繞著鎢絲的發光表面有很高的亮度,可達2,000-3,000熙提。這種低壓燈比上面提到的高壓燈泡具有更大的照明亮度,但它的發光表面積只有幾個平方毫米,這對于臨界照明是太小了,但是在使用柯勒照明時這一點可以用一個聚光透鏡加以補償。
在現代光學顯徽鏡中經常使用的除低壓鎢燈外,還有高壓汞燈和高壓傲燈,下面就這幾種光源的發射光譜分布、性能及其應用做一簡要的敘述和比較。
1。低壓鎢燈
帶有可調變壓器的低壓鎢燈使用方便,并且價格也比較便宜,它能夠為很多顯徽鏡的觀察和照相提供滿意的光產量。然而這種鎢燈具有一些典型的缺點,在某些場合這些缺點暴露得如此明顯,以至于不得不去尋找其他的光源。低壓鎢燈所發射的光能有一個對顯微鏡非常不利的光譜分布,其zui大部分是在紅外光或不可見的熱輻射區域,在低于750nm的可見光區域發射的光主要是較長波長的光線,在鴿燈使用超高壓的情況下,在可見光范圍內的光產量會有一些增加,但是這會相應地降低燈泡的壽命,并且在光產量上的增加也是不穩定的。
鎢燈所涉及的另一個問題是燈泡會在使用中逐漸變暗,這是由于從發熱的燈絲上蒸發的鎢會沉積在燈泡的內表面上,結果引起光產量的逐漸降低和發射光能譜分布的變化。近些年來所出現的鎢鹵燈可以認為是對低壓鎢燈的一項有效的改進,這種燈在玻璃燈泡內充滿著與鎢暫時結合的鹵素氣體(例如碘),從加熱的燈絲上以氣體的形式發散出來,然后被限制的鎢重新沉積在燈絲上,鹵素氣體又被釋放出來并再次循環往復。由于這種燈具有用于顯微鏡中所有鎢燈的zui高光產量和長達數千小時的燈泡壽命,因此已經非常普迫地應用于顯微鏡中,特別是顯徽照相中。但是由于這種燈的燈絲小而密集,燈絲的沮度很高,可以達到3,000^-3,1001,因此它們發射出大盤的熱t,燈室僻要用通風孔來冷卻,并且需要用吸熱濾片吸收部分熱量。
2.離壓汞燈
這是一種由石英制成的在放電筒內兩個高壓電極之間發射汞的氣體放電燈,與鎢燈的連續光譜相反,它在可見光范圍內有更加分散的帶狀光譜,在一條比較低的連續的基部上在一定的波長部位益加著窄而高的發射帶(圖5 , 9 I )由于它在546, 436和
365n m波長有特殊的發射高峰,因此通過選擇濾光片進行選擇時,對于熒光顯微鏡說是一種非常有效的光源。但由于帶狀光譜的限制,不能使染色切片得到好的反差,盡管如此,它仍然是一個在光譜的zui佳部分具有相當大光能發射的良好光源。
3.高壓故燈
這是一種發射氮氣的比較新型的氣體放電燈,它有更多的優點。在可見光范圍內具有連續發射光譜,在紫外光部分有一定的發射連續光譜。在今天被認為是zui有效的通用光源同時這種高壓敘燈能夠穩定地提供極高的亮度,因此它是一種的光源,并且在一些特種顯微鏡中有著不可替代的地位www.cnrico.com
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