1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)
（1）超薄切片厚50～70nm左右，載于200～300網孔的鎳網上；
（2）滴1%的H2O2液1滴于蠟板上，將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h；
（3）雙蒸水洗3次，每次10分鐘。第1、2次洗法如（2），浮于液面上，第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗，水流應有適當壓力，但不易過強。用濾紙在網緣將水吸干；
（4）浮于正常羊血清（1：50～1：100）滴上，室溫 30～60min，以飽和固定劑中的游離醛基和占據非特異性結合部位；
（5）PBS漂洗3min，洗一次（有人主張不洗）；
（6）濾紙吸干，孵育于第一抗體血清滴上，先室溫1h，再置于4℃ 24～36h；
（7）PBS漂洗3次，每次3min；
（8）置網于PBS（含1% 的牛血清白蛋白 pH8.2）中，5min。此步為與膠體金結合做準備；
（9）置網于膠體金標記抗體液1：30～1：100，淡紅色為適宜稀釋度，室溫，1min～1h；
（10）雙蒸水洗3次，每次3min。
如作雙重染色，則應將鎳網翻過來，在另一面，用另一類抗體血清，重復上述步驟（2）～（10）；
（11）5%醋酸鈾（雙蒸水配制），染色5min，雙蒸水洗凈；
（12）枸櫞酸鉛染色5min，雙蒸水洗凈；
（13）電鏡觀察。
2、包埋前染色
（1）組織經過適當固定，為增強細胞穿透性，可在固定液中加入皂角素，使其濃度為0.01%，經含皂角液固定劑處理5～8min后，用0.01mol/L PBS pH7.4沖洗12h左右，中間換洗3～4次；
（2）組織切片貼于明膠涂抹的波片上，細胞可制成混懸液，用離心法操作或制成涂片；
（3）0.05mol/L TBS pH7.4洗3min；
（4）以1：5正常羊血清處理切片 30min，室溫，以阻斷非特異性吸附；
（5）一抗4℃孵育20h后室溫2h或過夜；
（6）0.05%mol/L TBS pH7.4洗3min，3次；
（7）0.02%mol/L TBS pH8.2洗3min，3次，為與膠體金結合作準備；
（8）再次阻斷非特異性吸附，同（4）；
（9）以金標記的二抗（工作濃度為1：40左右）在室溫下孵育1h；
（10）0.02%mol/L TBS pH8.2洗3min
（11）0.05%mol/L TBS pH7.4洗3min，3次；
（12）1%鋨酸（0.1mol/L PBS）1h；
（13）雙蒸水洗15min；
（14）常規脫水包埋，超薄切片；
（15）枸櫞酸鉛對照染色。