免疫酶細胞化學技術中的雙PAP法檢測微量抗原

在復合物體系中連接更多的PAP復合物，來進一步放大抗原，從而使靈敏度更為增強，適用于檢測微量抗原。

實驗方法：

1.  將固定后的標本用PBS漂洗；

2. 于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min，用來密封內源性過氧化物酶；

3. PBS漂洗2次，每次3min；

4. 在室溫下用二抗的正常血清孵育20min；

5. 滴加一抗后在室溫下放置1h或4℃冰箱內過夜；

6. PBS漂洗3次，每次3min；

7. 滴加二抗后于室溫放置30min；

8. 重復步驟6；

9. 加PAP復合物，室溫60min；

10. 重復步驟6；

11. 第二次滴加酶標二抗；

12. 用PBS液反復漂洗；

13. 第二次加PAP復合物；

14. 重復步驟12；

15. 將標本置于0.04%DAB+0.03%H2O2的溶液中顯色5~10min；

16. 用蘇木精復染后封片，鏡檢。