全自動生化分析儀的定標與校準

目前我國縣級以上包括縣醫院均配置有全自動生化分析儀，甚至沿海縣區的中心衛生院也配備了，絕大部分為自建檢測系統。問及校準他們會拿出來的是K值記錄，問及K值怎么得來的？都說用一個校準品的標示值來定標，K值自動顯示。把一點定標作為校準對待，這樣做對嗎？另一方面，使用校準品也有問題，這些都值得深思。

一、校準與衛生資格考試網定標有無區別？

校準與定標均來自英文“Calibrate”一詞，似乎沒有什么區別。讓我們首先復習一下校準的定義和內涵。

我們查閱和溫習了《臨床實驗室質量控制（QC)》的要求，上面對“校準”是這樣描述的：“在一定條件下的一系列操作來確定檢測儀器和檢測系統所指示的量值，或者某一物質，或者參考物質代表的值，與相應標準所認識量之間的關系。”接下來必需做“校準驗證”，“就是要求按標本方式對校準品進步分析，以檢查并證實儀器、試劑盒或檢驗系統的檢驗結果在規定的報告范圍內保持穩定。”這才是規范化的校準過程。同時文件指出自己建立的檢測系統必須建立校準方法：

①選擇合適的校（標)準品，包括校（標)準品的數目、類型和濃度；

②如有可能，校（標)準品應溯源到參考方法和或參考物質；

③確定校準的頻度。

同時建立校準驗證方法：

①如有可能，方法應追溯到參考方法或己知值的參考品；

②確定校（標)準品的數目類型和濃度，校準驗證的接受限，以及校準驗證的頻度；

③確定檢驗詰的報告范圍，確定時必須包括一個最小值，中間值和此范圍的上限的最大值。同時還規定六個月以及有下列情況發生時，進行一次校驗，如儀器或檢測系統進行過一次大的預防性維護或者更換了重要部件；質控反映出異常趨勢或偏移，或者超出了實驗室規定的接受限，采取一般性糾正措施后，不能識別和糾正問題時。最后特別強調所有進行過的校準和校準驗證工作時必須記錄并寫成文件。

馮仁豐教授在《CLIA’88更新規則介紹》報告中也論及校準和校準驗證(確認)：“要求校準的項目，你必須繼續按照廠商要求，進行校準和校準確認(驗證)。但是，校準和校準確認(驗證)至少半年進行一次，在檢驗的可報告范圍內，至少用三個水平予以確認。”

通過上述文件和專家報告學習，我們應該十分請楚校準的涵意，應該包括校準和校準驗證兩個方面，正確的校準和校準驗證對于檢驗結果在規定的報告范圍內的準確和可靠是必要的。

在正規文件中，我們還沒有找到“定標”的名詞解釋。但在儀器中文說明書上倒有定標名詞多次出現。

二、“單點定標”作校準可不可以？

涂植光教授主編的《臨床檢驗生物化學》在“臨床生物化學自動分析析方法”（P364)中提及“分析儀器測定方法基本上都需要校準（Calibration)，也稱定標，因為分光光度法可以看成是比例光度法。”同時在標準液個數及濃度時又說“校準曲線線性好并通過坐標零點，可采用一個校準液；線性好的但不通過坐標零點，應使用兩個以上的校準液。對于校準曲線呈非線性者，必須使用3個以上校準液，每一個校準液都有一個合適的濃度”。著者后面也談及校準核查。

馮仁豐教授在從玉隆教授主編《臨床實驗室管理》第四章“臨床檢驗質量管理技術基礎”（P62)大多數檢驗室又習慣以單一標準來校準結果，原則上應在標準曲線呈通過原點的直線時才可作這樣的處理。呈不通過原點的直線關系時，至少應使用兩點定標；呈拋物曲線狀時，應使用多點定標。

通過上述復習，“單定定標”作校準應該是條件的，如果廠家有關方法穩定性文件或者自建檢測系統的評價中，已經證明該項目性能特點之一的標準曲線是線性關系，而且a值幾乎為0，即Y=bX，我也認為可以用單點定標作校準，但可不能忘記做校準驗證。如果某項目雖屬線性，但a不等于0，即存在截距，它的方程應該是 Y=a+b1X的話，您用單點校準，硬把它作Y=b2X處理，既有斜率變化，也存在截距a造成偏差，用定標點A值代入兩個方程式，應該結果是一樣的，但離您定標點較遠的濃度標本會造成較大偏差。截距a是正值或負值造成偏差也不同了。如果您應用“校準驗證”高、中、低值校準品就會發現，離定標點較遠的濃度帶采較大誤差，同時肯定也通不過“校準驗證”。如果某項目標準曲線不是線性而是拋物曲線，只能用多點校準和校準驗證了，更不能用單點定標作校準。

當今我們知道國內不少單位都是自建檢測系統，而且也未對每一項目做過性能評價，標準曲線的性質不明，如果您用單點定標作校準，也不做校準驗證，就轉入測定標本，就必然陷入我說的誤區或陷阱。所以用“單點定標”作校準要注意前堤和一定要進行校準驗證。

三、校準品亂用十分普遍，不知道校準品有專用性

上個世紀50年代都用標準品或標準液來校準檢測方法，那時使用標準品時不強調它的專用性。后來發現這樣做法忽視了標本和標準處于完全不同基質狀態，知道有基質和基質效應后，不宜再用標準液了，約20年前開始引用具有與護士招聘網患者樣品基質相似的校準品替代標準品，用于日常工作以消除基質效應。但校準品具有專用性，它只能專用于指定的某公司型號的儀器、試劑、方法和檢測程序組成的檢測系統，才能起校準和溯源作用。

所以校準品只能為指定的檢測系統服務，不能對其他系統作校準用。如果用在其它檢測系統作校準，將會嚴重影響檢驗質量，使病人樣品的檢測結果不可靠，更不具有溯源性。由于部分同志對校準品專用性認識不足，所以校準品亂用十分普遍，我們應該及時糾正。現在最實用的是利用病人新鮮標本（其實是最佳校準品)和方法學比較為基礎，實現標準轉移的辦法。或者在自建檢測系統校準后，將優質某批號校準品重新定靶值，然后用己建有新靶值該批號校準品來作本自建檢測系統校準用，這種做法也僅僅是過渡辦法而己。

雖然國外也有生產具有多個校準值的校準品，但只適應國外知名品牌的封閉檢測系統，不一定能用于我國多種多樣的自建檢測系統，何況還必須通過科學比對才能知曉可否使用，當今不能解決我們面臨的實際問題。據悉目前國內外正試圖研發幾乎沒有基質效應的互通性校準品，如果獲得成功并能大量供應市場，對我們來講將是一個好消息。