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  • 發布時間:2019-04-17 16:06 原文鏈接: 全自動細菌鑒定和藥敏分析儀器的探討

    全自動微生物鑒定和藥敏分析系統由于自動化程度高,功能齊全,體現了微生物檢驗的最新進展,廣泛運用于臨床微生物檢驗、衛生防疫和商檢等部門。
          1.    由多種病原微生物所致的傳染病遍布臨床各個科室,其中細菌性感染最為常見,因此抗菌藥物也就成為臨床應用最廣泛的藥物之一。在抗菌藥物治愈和挽救了許多患者生命的同時,也出現了由于抗菌藥物應用不合理的問題,給病人健康乃至生命造成了重大影響。所以準確、及時的發現和鑒定病原體并快速做出病原學診斷和藥物敏感性試驗是當務之急。從上世紀80年代后期微生物學家和工程技術人員密切合作,在對微生物進行深人研究的基礎上,采用物理和化學的分析方法,根據細菌不同的生物特性和代謝產物的差異,逐步發展了微量快速培養基和微量生化反應系統,在儀器內部安裝了恒溫孵育箱,通過微機和恒溫電路自動維持和調節溫度,自動檢測是否有細菌生成及細菌的類型,使微生物鑒定和抗菌素敏感性試驗及最低抑菌濃度值(MIC)的測定在一臺儀器中自動完成。至今,全國應用自動化細菌鑒定儀器的臨床細菌室約占近半的比例,為快速、正確的細菌學報告及指導臨床合理用藥提供了可靠的依據。

     


     2 全自動微生物鑒定和藥敏分析儀器的介紹
          該類儀器是用于鑒定各種病原菌,主要是革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、腸球菌屬及真菌等,檢驗菌種可達500多種。可以同時做抗菌藥物敏感性試驗,以幫助臨床醫生做出正確的病原學診斷并制定治療方法。
     2.1 儀器的基本工作原理
         全自動微生物鑒定和藥敏分析類儀器結合自動化、微機化和先進的微生物檢驗方法,可同時做細菌鑒定和藥敏試驗,能夠對臨床大多數細菌進行快速鑒定和藥敏實驗。
          細菌鑒定原理:采用傳統的比色法和快速熒光法。根據不同類別細菌的理化性質不同,設計不同的測試卡,每一張卡包括多項生化反應。儀器采用光電比色法測定細菌因分解底物導致PH值改變或由于細菌生長利用底物而引起的透光度變化;其熒光法是在測試卡的小孔中加人酶底物,使其與細菌產生的酶結合生成熒光物質。儀器在較短的時間內能夠分析細菌對不同生化底物所產生的發熒光的物質,通過讀數器測定熒光強度來判定細菌胞外酶;采用熒光技術鑒定細菌,速度可以提高4-8倍。兩小時可提供鑒定報告。
         細菌鑒定實驗底物有幾種不同類型,各個不同品牌的儀器均使用自己的測試卡和相應的試劑;以酶為基礎的反應底物,包括顯色底物和熒光底物;以微生物生長為基礎的底物是糖類底物和化合物底物,還有混合底物;通過與各種細菌發生氧化、降解及水解反應,產生顏色的變化或產生熒光物質,利用顯色和熒光強度的變化來鑒定細菌的菌型。儀器會自動選擇底物進行分析。
          藥敏試驗也有兩種測定法:比濁法和熒光測定法。根據藥敏試驗的判讀標準,每一種藥物設計了多個稀釋梯度,每一種抗生素測定最低抑菌濃度可用3-8個測試孔不等,在卡中加人一定濃度的菌懸液;系統配有專用光電比濁儀,便于測定由不同細菌配置菌懸液的濃度。由于孔內微生物生長會形成小顆粒或聚集成團塊將引起濁度變化,儀器采用光電比濁法測定各個測試孔的濁度變化,每隔一定時間讀取數據一次,讀數器會測得不同的吸光度值,得以獲取待檢菌在不同濃度藥液及不同藥物中的生長率。最低抑菌濃度值(MIC)的測定是在含有各種濃度的抗生素的反應卡中加人待測細菌的菌懸液,經過一定時間孵育后,用光電比濁法測定其透光率,獲取吸光度值,若細菌生長,濁度增加,吸光度值增大,表示該孔內的抗生素不能抑制細菌,反之表示細菌被抑制,以最小藥物濃度仍然能夠抑制細菌的反應孔為該種抗生素對此菌的MIC值。用熒光技術測定時在肉湯中加人熒光底物,大部分菌種都能在5小時內判讀MIC值,并根據相應標準報告其藥物敏感結果(S,I,R)。MIC卡每種藥物均有多個稀釋度。儀器在每一次讀取數值后,自動將所測取的數據與存儲在硬盤中的菌種資料庫標準菌生物模型相比較,由電腦分析得出的結果做出鑒定,可通過打印機打印報告。
     


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