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  • 發布時間:2024-07-10 20:07 原文鏈接: 關于多焦點多光子顯微技術的簡介

      多焦點多光子顯微技術是 20 世紀末發展起來的, 它與單光束激光掃描顯微鏡 相比最大的變化是:

      (1) 需要一 個光束分離裝置(如右圖)產生多個焦點;

      (2) 需要一個探測器能夠探測從所有焦點處發出的熒光信號 。

      多焦點多光子顯微技術采用旋轉微透鏡盤 、微透鏡陣列 [6]、級聯分束鏡 [7]或衍射光學元件 [8]將飛秒激光器輸出的光分成許多子光束 ,經過顯微鏡的中間光學系統和物鏡后聚焦到樣品上 , 產生衍射極限激發光點陣, 實現樣品的多焦點多光子并行激發 ,通過旋轉微透鏡盤或檢流計振鏡掃描子光束來實現這個激發點陣在樣品上的掃描, 同時采用置于系統非解掃通道的面陣 CCD 相機接收樣品的熒光顯微圖像。通過對樣品的多焦點多光子并行激發和探測, MMM 極大提高了成像速度。

      另外, 多焦點多光子顯微技術在提高成像速度的同時, 也提高了多光子激發熒光顯微術對光源光能的利用率 ,而這也是傳統的單點掃描多光子激發顯微中存在的一個問題 。多光子激發熒光顯微技術所用光源一般是超短脈沖鎖模激光器 , 如鈦寶石鎖模飛秒激光器 ,其所輸出激光脈沖的平均功率為 1~2 W 而實際上,受樣品非線性損傷的限制, 傳統的單點掃描多光子激發熒光顯微所需的光功率大約為 3~10 mW因此, 對光能的利用率很低。同時, 這種并行的測量過程并沒有顯著影響空間分辨率。

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