1.淀粉酶測定
為主要診斷依據，用蘇氏比色法（Somogyi）測定，正常兒均在64單位以下，而急性胰腺炎則高達500單位以上。血清淀粉酶值在發病3h后即可增高，并逐漸上升，24～48h達高峰以后又漸下降。尿淀粉酶也有同樣變化。正常小于64單位，但病后升高較慢，病變緩解后下降的時間比血清淀粉酶遲緩，且受腎功能及尿濃度的影響，故不如血清淀粉酶準確。其他有關急腹癥如腸穿孔、腸梗阻、腸壞死時，淀粉酶也可升高，很少超過300～500單位。
2.血清脂肪酶測定
于發病24h后始升高，持續高值時較長，可為晚期疾病的診斷方法。正常值為0.5～1U（Comfort）。
3.腹腔穿刺
嚴重病例有腹膜炎者，難與其他原因所致腹膜炎相鑒別時，如胰腺遭到嚴重破壞、血清淀粉酶反而不增高，此時腹腔液多可行腹腔空刺，根據腹腔滲液的性質（血性、混有脂肪壞死）及淀粉酶增高，有助于診斷。
4.B超檢查
對水腫型胰腺炎及后期并發胰腺囊腫者確診有價值，前者顯示胰腺明顯增大，后者顯示囊性包塊與胰腺相連。
5.淀粉酶和肌酐清除率比值
尿淀粉酶/血清淀粉酶×血肌酐/尿肌酐×100%=正常比值為1%～4%，大于6%提示為急性胰腺炎。