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  • 發布時間:2020-07-06 10:44 原文鏈接: 動物基因組DNA快速提取試劑盒使用說明

    動物基因組DNA 快速提取(50 次)
    概述:
    本方法用于動物組織基因DNA 的快速提取,可提取107-108 動物細胞,其質量能夠滿足
    各種分子生物學要求。
    組成:
    1.溶液A 1ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
    2.溶液B 55ml
    3.溶液C 100ml×2 兩瓶,均為100ml
    4.溶液D 3ml Resin 用時充分混勻
    5. 溶液E 50ml 洗液(用前加入75ml 無水酒精,充分混勻)
    6.溶液F 20ml TE buffer
    步驟:
    1.稱取100-300mg 動物組織,液氮研磨成粉狀,將粉末移入1.5ml 離心管中,加入1ml
    溶液B,振蕩混勻,室溫放置5min。
    2. 12000rpm 離心5min。
    3.將上清移入5ml 離心管中,加入2.5ml 溶液C,20μl 溶液A ,50μl 溶液D,充分混勻,
    室溫放置20min。
    4. ≥8000rpm 離心5min,棄上清。
    5. 加入1ml 溶液C,充分混勻,≥8000rpm 離心1min,棄上清。
    6.加入1ml 溶液E,充分混勻,≥8000rpm 離心1min,棄上清。
    7.重復步驟6。
    8. ≥12000rpm,離心1min,吸干上清,室溫晾干約5-10min,使乙醇揮發殆盡。
    9. 取溶液F 200-300μl,混勻,40-50℃水浴5min。
    10.≥12000rpm 離心1min,取上清液即為DNA。
    注:1.組織若多,可適當加大溶液B 和溶液D 的用量,其它成份不變。
    2.混勻一定要溫和,否則DNA 大分子將被打斷使部分降解。
    3.用戶可依實驗需要,適當調整溶液F 加入量,溶液F 越少,DNA 濃度越高,但產量略有損失,若
    想最大限度提高產量,可重復步驟9、10。兩次所得DNA 可合在一處。

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