對有右上腹突發性疼痛，并向右肩背部放射，伴有發熱、惡心、嘔吐，體檢右上腹壓痛和肌衛，Murphy征陽性，白細胞計數增高，B超示膽囊壁水腫，即可確診為本病。如以往有膽絞痛病史，則診斷更可肯定。
需要指出的是，15%～20%的病例其臨床表現較輕，或癥狀發生后隨即有所緩解，但實際病情仍在進展時，可增加診斷上的困難。
十二指腸引流試驗對急性膽囊炎的診斷幫助不大，反而會促使膽囊收縮而加重腹痛，引起膽石嵌頓。故在病程急性期，十二指腸引流應視為禁忌。
