取對照品溶液或供試品溶液200μL,加正亮氨酸內標溶液20μL,加入0.1mol/L異硫氰酸苯酯乙腈溶液100μL,1mol/L三乙胺乙腈溶液100μL,混勻,室溫下放置1h,加入正己烷400μL,振搖,放置10min,取下層溶液,即得。
精密吸取衍生化后供試品溶液及對照品溶液各1μL,按上述色譜條件測定脯氨酸及內標峰面積,計算脯氨酸面積與內標峰面積比值,采用內標法計算脯氨酸濃度。