（1）芽孢染色— 將培養24小時左右的枯草芽孢桿菌或其他芽孢桿菌，作涂片、干燥、固定。
（2）芽孢染色— 滴加3—5滴孔雀綠染液于已固定的涂片上。
（3）芽孢染色— 用木夾夾住載玻片在火焰上加熱，使染液冒蒸汽但勿沸騰，切忌使染液蒸干，必要時可添加少許染液。加熱時間從染液冒蒸汽時開始計算約4—5分鐘。這一步也可不加熱，改用飽和的孔雀綠水溶液（約7．6%）染10分鐘。
（4）芽孢染色— 傾去染液，待玻片冷卻后水洗至孔雀綠不再褪色為止。
（5）芽孢染色— 用番紅水溶液復染1分鐘，水洗至水為無色。
（6）芽孢染色— 待干燥后，置油鏡觀察，芽孢呈綠色，菌體呈紅色。