照高效液相色譜法（通則0512）測定。
1、供試品溶液
取本品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1mL中約含1mg的溶液。
2、對照品溶液
取青霉素對照品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1mL中約含1mg的溶液。
3、系統適用性溶液
取青霉素系統適用性對照品適量，加水溶解并稀釋制成每1mL中約含1mg的溶液。
4、色譜條件
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以有關物質項下的流動相A-流動相B（85:15）為流動相，檢測波長為225nm，進樣體積為20μL。
5、系統適用性要求
系統適用性溶液色譜圖應與標準圖譜一致。
6、測定法
精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算，其結果乘以1.1136，即為供試品中C16H17KN2O4S的含量。