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  • 發布時間:2019-04-11 15:08 原文鏈接: 農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗1

    根癌農桿菌菌液的準備

    實驗材料

    農桿菌細胞

    試劑、試劑盒

    根癌農桿菌甘油原液抗生素

    儀器、耗材

    MG L 液體培養基

    實驗步驟

    1. 從根癌農桿菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液體培養基并添加相應抗生素的 50 ml 無菌管中,28℃、250 r/min 搖床振蕩培養過夜(17~20 h) 至 OD600nm =1.0~1. 5。

    2. 農桿菌細胞在 4500 g 下離心 10 min 后,棄上清(見注 4 ),用 4 ml 的 1X 侵染培養基重懸農桿菌細胞 。




    3. 將重懸后含農桿菌的侵染培養基置于 50 ml 無菌管中,28°C 黑暗條件下搖床中振蕩培養 1~3 h(見注 5 ) 。


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