(1)原理：凝固酶試驗是鑒定葡萄球菌致病性的重要試驗。致病性葡萄球菌可產生兩種凝固酶，一種是與細胞壁結合的凝聚因子，稱結合凝固酶，它直接作用于血漿中纖維蛋白原，使其變為纖維蛋白，發生凝集，包圍于細菌外面而凝聚成塊，可用玻片法測出;另一種凝固酶是分泌至菌體外，稱為游離凝固酶，它能使凝血酶原變成凝血酶類產物，使纖維蛋白原變為纖維蛋白，從而使血漿凝固，可用試管法測出。
(2)方法：
①玻片法：取兔血漿和鹽水各一滴，分別置于潔凈的玻片中央，用接種環取待檢菌分別與血漿和鹽水混合。
②試管法：取試管2支，各加0.5ml人或兔血漿，挑取被檢菌和陽性對照菌分別加入血漿中并均勻，置37℃水浴3-4小時，每30min觀察1次結果。
(3)結果：
①玻片法：以血漿中有明顯的顆粒出現而鹽水中無自凝現象為陽性。
②試管法：如有凝塊或整管凝集出現為陽性。2h后無上述現象出現，則放置過夜后再觀察。
(4)應用：凝固酶試驗是鑒定葡萄球菌致病性的重要試驗，也是葡萄球鑒別時常用的試驗。