實驗方法原理
玻片凝集法可利用已知抗血淸鑒定未知細菌,優點是極端快速,為診斷腸道傳染病時鑒定病入標本中腸道細菌的重要手段。
血清學反應的基本組成成分除抗原與相對應的抗體外,尚需加入電解質(一般用生理鹽水)。電解質的作用主要是消除抗原抗體結合物表面上的電荷,使其失去同電相斥的作用而轉變為互相吸引,否則即使抗原與抗體發生結合亦不能聚合成明顯的肉眼可見的反應物。
在一系列稀釋的血清中(例如 1:5、1:10、1:20、1:40……),能與抗原發生明顯凝集反應的最高稀釋度的倒數,即為該免疫血清的效價。假如從 1:5 至 1:20 三個稀釋度有凝集反應,1:40 的無凝集反應,則血清效價為 20。
實驗材料 大腸桿菌瓊脂斜面培養物
試劑、試劑盒 大腸桿菌免疫血清生理鹽水
儀器、耗材 玻片接種環
實驗步驟
1. 在玻片的一端用滴瓶中的小滴管加一滴 1:10 大腸桿菌免疫血清,另一端加一滴生理鹽水。
2. 用接種環自大腸桿菌瓊脂斜面上挑取少許細菌混入生理鹽水內,并攪勻;同法挑取少許細菌混入血清內,攪勻。
3. 將玻片略為擺動后靜置室溫中,1~3 分鐘后即可觀察到一端有凝集反應出現(圖 1),另一端為生理鹽水對照,仍為均勻混濁。
A. 稀釋抗血清+大腸桿菌(陽性反應);
B. 生理鹽水+ 大腸桿菌(陰性反應)。