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  • 發布時間:2021-05-12 16:58 原文鏈接: 切刻內切酶(NEAR)恒溫擴增

      切刻內切酶(NEAR)恒溫擴增是目前相關研究最少的一種恒溫核酸擴增技術。它是在2008年由Ionian科技公司的研究人員開發并申請ZL的(Brain等2009)。除了鏈置換酶(Bst)外,NEAR反應中還需添加一個切刻內切酶。NEAR反應的引物設計需要將所使用的切刻內切酶的DNA作為序列加在引物的5' 端。NEAR反應可以分為兩步,第一步,Bst和模板DNA進行反應生成含有切刻內切酶識別序列的少量DNA。這些DNA在第二步作為模板,切刻內切酶先將單鏈切斷,Bst在進行新鏈合成。基本上在5-10分鐘就可以形成大量新合成DNA可以進行檢測。NEAR產物的檢測基本上和PCR一樣。可以使用SYBR Green,可以使用熒光探針,也可以使用分子探針(molecular beacon)。目前Alere是唯一一家使用NEAR技術開發人類疾病診斷試劑盒及儀器的公司。Alere的Influenza A和B的檢測試劑盒基本上在13分鐘內可以完成檢測。另一個關于StrepA的檢測試劑盒基本上在8分鐘可以完成對病原菌的檢測。這是關于Flu和StrepA最快的分子的檢測試劑盒。

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