ATP標準曲線既可以驗證試驗條件也可以用來計算細胞內ATP的含量。因此ATP標準品濃度范圍從1nM至10uM產生的化學發光信號范圍可覆蓋整個不同細胞數目孔中產生的信號值(圖二),檢測的線性范圍大于四個數量級。
經十字孢堿(staurosporine)和茴香霉素 (anisomycin)等化合物處理后細胞其活力的變化可通過檢測ATP水平而實現(圖三)。細胞毒性可以通過檢測其AK量變化而實現(圖四)。十字孢堿(0.34uM和0.15uM)和茴香霉素(3.30uM和2.28uM)兩次處理試驗獲得相似的IC50值。
結論
在利用SpectraMax i3x讀板機化學發光檢測功能進行基于ATP變化的細胞活力和基于AK變化的細胞毒性檢測時其表現出了超高靈敏性,檢測下限可至10個細胞每孔。可通過專業級別的SoftMax Pro 軟件進行四參數擬合,隨后直接計算出IC50值。軟件可以自動優化微孔板的檢測高度,可幫助用戶獲得最佳的信號值。
主機除了具有化學發光檢測功能以外,SpectraMax i3x讀板機可升級具有更多檢測功能以滿足用戶對不同試驗的不同檢測需求。此儀器的光吸收和熒光強度檢測功能, 光源采用了ZL的光譜融合技術(Spectra FusionTM Illmumination)使其既可以兼顧了波長靈活性也可以獲得最佳檢測信號。
主機可加入具有新檢測功能的卡盒,用戶自己可隨時進行功能升級,包括時間分辨熒光檢測功能和Western Blot檢測功能,也可選配Spectra. MiniMaxTM 300細胞成像模塊,擴展此讀板機檢測能力和應用范圍。儀器所有功能均可以使用一種軟件進行操作,即專業級別的SoftMax Pro軟件,其中包含了CellTiter-Glo等近120預置檢測模板可方便用戶自己快速進行數據收集和數據分析。