[實驗目的]
1. 通過青蛙或小白鼠骨髓細胞染色體的制備，初步掌握低滲法制備動物骨髓細胞染色體的方法。
2. 熟悉染色體的形態、種類及青蛙、小白鼠等動物染色體的數目或類別。
[實驗原理]
骨髓細胞是具有旺盛分裂能力的細胞，從這些分裂細胞中，可觀察到處于分裂中期的染色體，能對一種動物染色體的形態特征、數目進行準確的觀察和分析。由于骨髓直接涂片觀察到的分裂相少，效果差，因此要對骨髓細胞進行必要的處理。這個處理方法稱為低滲法，其基本要求首先是要獲得較多的中期分裂相。秋水仙素對分裂期紡錘絲的形成具有破壞作用，當動物被注射適量的秋水仙素后，處于分裂增殖中的骨髓細胞由于紡錘絲不能形成，中期染色體不能正常趨向兩極，到達后期、末期，因而大量的細胞處于觀察染色體形態最佳的分裂中期。其次是要能夠清楚的觀察染色體的形態。為了達到此目的，取出的骨髓細胞要經過低滲（kcl溶液）使細胞膨脹、染色體適當的分散。固定（甲醇、冰醋酸）使染色體保持完好的形態。染色（giemsa液）使染色體易分辨、觀察。制備優良的標本可獲得滿意的觀察效果。利用動物骨髓制作染色體觀察標本取材容易，不需培養，不需無菌操作，比較簡便，是生物學實驗教學中常用的方法。一般選用的動物有青蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠等。
[實驗用品]
1. 動物：青蛙或小白鼠、大白鼠、蟾蜍，雌雄均可。
2. 試劑：0.02﹪秋水仙素、0.075mol/l氯化鉀 (kcl)、3:1甲醇、冰醋酸固定液、吉姆薩（giemsa）染液、香柏油或液體石蠟、二甲苯。
3. 器材：解剖盤、小鑷子、剪刀、注射器（2ml、5ml各一支）、刻度離心管、玻璃吸管、預冷載玻片、染色缸、玻片盒、量筒（10ml、50ml、100ml各一支），恒溫水浴箱，盤架天平（配備等大的小燒杯兩個）、電吹風、顯微鏡、吸水紙、擦鏡紙、酒精燈、火柴。
[實驗內容與方法]
一、試劑配制
1. 0.02﹪秋水仙素溶液：秋水仙素2mg，滅活生理鹽水（蛙類0.65﹪、哺乳類0.85﹪的nacl）10ml溶解，避光保存。
2. 0.075mol/l kc1溶液：
原液： kcl 11.8g雙蒸水100ml溶解。
使用液：原液1份，雙蒸餾水19份混合，
3. 吉姆薩 (giemsa)染液：
原液：吉姆薩染粉0.5g，甘油33ml，甲醇33ml，配制時先將giemsa粉置于研體中，加入少量甘油，研磨至無顆粒，再加入余下的甘油，拌勻后放入56℃溫箱中保溫2小時，然后取出加入甲醇，充分拌勻，濾紙過濾用棕色瓶密封，避光保存，一般要放置2周后才能使用。
使用液：原液1份，ph6.8磷酸緩沖液9份稀釋。使用液不宜長期保存，一般現配現用。
4. ph6.8磷酸緩沖液：該液可先配成甲液和乙液，然后混合使用。
甲液：kh2po4 0.907g蒸餾水100ml溶解。
乙液：na2hpo4·2h20 1.18g（或na2hpo4·12h20 2.38g）加蒸餾水100ml溶解。
使用液 (ph6.8)：甲液50.8ml，乙液49.2ml混合，該使用液也不易久放，一般也是現配現用。