增強發光酶免疫分析(enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA )在發光系統中加入增強發光劑, 如對2碘苯酚等, 以增強發光信號,并在較長時間內保持穩定, 便于重復測量, 從而提高分析靈敏度和準確性。在全自動分析儀上, 還可通過計算機嚴密控制, 進行自動操作, 如加試劑,混合, 溫育, 洗滌, 加發光試劑, 發光計數, 數據處理, 繪制標準曲線, 直至完成病人血清樣品的分析并打印出結果。Am erliteTM發光增強酶免分析系統用熒光素、噻唑等增強劑, 其發光時間可持續長達20m in, 試劑盒有甲狀腺功能檢測的促甲狀腺素、三碘甲腺原氨酸、甲狀腺素、甲狀腺素結合球蛋白、游離甲狀腺素, 與性激素有關的有促黃體激素、促卵泡激素、人絨毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睪酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、鐵蛋白、地高辛等。
ALP標記的CLEIA所用底物為環1, 22二氧乙烷衍生物, 這是一類很有前途的發光底物 ,用于化學發光酶免分析底物而設計的分子結構中包含起穩定作用的基團——金剛烷基, 其分子中發光基團為芳香基團和酶作用的基團,在酶及起動發光試劑作用下引起化學發光。最常使用的底物是AM PPD [ 32(2’2 spiroadam an2tane ) 42methoxy242( 3’2 phosphoryloxy) 2phenyl21,22dioxetane ], 中文名為: 32(2’2螺金剛烷) 242甲氧基242(3’2 磷酰氧基) 2苯基21, 22環二氧乙烷)。在堿性磷酸酶(AL P) 作用下,磷酸酯基發生水解而脫去一個磷酸基, 得到一個中等穩定的中間體AM PD (半壽期為2～ 30m in) ,此中間體經分子內電子轉移裂解為一分子的金剛烷酮和一分子處于激發態的間氧苯甲酸甲酯陰離子, 當其回到基態時產生470nm 的光,可持續幾十分鐘。AM PPD 為磷酸酯酶的直接化學發光底物,可用來檢測堿性磷酸酯酶或酶和抗體、核酸探針及其它配基的結合物。可檢測到堿性磷酸酯酶的濃度為10 -15mol/L 。