化學發光酶免疫分析（CLEIA）是用參與催化某一化學發光反應的酶如辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（ALP）來標記抗體（或抗原），與待測標本中相應的抗原（抗體）發生免疫反應后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復合物，經洗滌后，加入底物（發光劑），酶催化和分解底物發光。
（一）辣根過氧化物酶標記的化學發光免疫分析
采用辣根過氧化物酶（HRP）標記抗體（或抗原），與反應體系中的待測標本和固相載體發生免疫反應后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復合物，這時加入魯米諾發光劑、H2O2和化學發光增強劑使其產生化學發光。
（二）堿性磷酸酶標記的化學發光免疫分析
以堿性磷酸酶（ALP）標記抗體（或抗原），反應后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復合物，加入AMPPD發光劑，堿性磷酸酶使AMPPD脫去磷酸根基團而發光。
化學發光酶免疫分析的特點：
①屬酶免疫測定范疇，測定過程與ELISA相似，僅最后一步酶反應的底物改為發光劑和測定的儀器為光信號檢測儀；
②酶標記抗原或抗體結合穩定；
③酶催化魯米諾、AMPPD等發光劑發出的光穩定，持續時間長，便于記錄和測定。