1~5 ml/min 的速度上樣于蛋白A-Sepharose柱，用Tris緩沖液洗柱子直至所有的未結合的蛋白都被洗脫，采用A280監測。
3. 依次用2~3倍柱床體積的檸檬酸緩沖液、乙酸緩沖液液以及甘氨酸·Cl緩沖液連續洗脫結合蛋白，洗脫下的蛋白直接接入裝有中和緩沖液的管中，中和緩沖液的體積應為所收集蛋白體積的1/4。4. 采用ELISA法檢測抗原特異性MAb。
5. 在超濾器中濃縮所分離的單克隆抗體到1~5 mg/ml，所用超濾膜為XM50，將單克隆抗體存于-20℃。
樣品進入柱床速度為1ml~2ml/min，以NaCl線形梯度洗脫。大部分單克隆IgG于40mMol/L和80mMol/LNaCl洗脫，也有極少例外的單克隆抗體于120mMol/L~150mMol/LNaCl洗脫。測OD280nm收集蛋白峰，單克隆IgG保存備用。
單抗的特異性鑒定可以采用各種方法，如免疫熒光法、ELISA法、間接血凝和免疫印跡技術等，同時還需做免疫阻斷試驗等。
單抗的效價測定可采用凝集反應、ELISA或放射免疫測定。不同的測定方法效價不同。培養上清液的效價遠不如腹水的效價。采用凝集反應，腹水效價可達5×104.而采用ELISA檢查，腹水效價可達1.0×106.單抗的效價以培養上清和腹水的稀釋度表示。
必要時還可以測定單抗的親和力和識別抗原表位的能力測定。
