單分子熒光染料——ATTO熒光染料

單分子熒光檢測技術是近十年來迅速發展起來的一種超靈敏的檢測技術，其檢測尺度可以精確到納米量級，是單分子檢測的首選方法。該檢測技術利用熒光標記來顯示和追蹤單個分子的構象變化、動力學、單分子之間的相互作用以及進行單分子操縱。而熒光染料作為重要的標記物在單分子檢測中起到了舉足輕重的作用。

熒光染料，指吸收某一波長的光波后能發射出另一波長大于吸收光的光波的物質。其作為標記物，廣泛應用于熒光免疫、熒光探針、細胞染色等多個方面。包括特異性的DNA染色，用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關研究。

ATTO是最為常見的熒光染料之一，其可作為一系列生物分子如蛋白質和核酸的熒光標記和分子探針，其波譜涵蓋了從紫外光到近紅外光范圍，是最全波段的熒光標記。 與其他染料相比，其在紅色光譜區中擁有優良的光穩定性和亮度。

熒光染料參數小知識：

1、初始亮度

是指示熒光染料的相對亮度，該值由摩爾消光系數和量子產率得出，這兩個參數對于每一單個熒光染料來說都是特異性的。具有較高初始亮度的熒光染料適用于檢測較低豐度的靶標。

2、緩沖液中的光穩定性

是初始熒光強度在經過30秒連續照明后殘留比率的相對百分比。緩沖體系中光穩定性較高的染料將更適合于活細胞成像和檢測等相關應用。

3、抗淬滅劑中的光穩定性

是初始熒光強度在經歷30秒連續照明后殘留強度的相對百分比。抗淬滅試劑中光穩定性較高的染料更適合于固定細胞樣本的成像和檢測實驗。

4、染色指數

是一個歸一化數值，可用于比較不同熒光染料在流式細胞術應用中熒光亮度的差異；該值通過使用陽性區域的平均熒光強度（MFI）減去陰性區域的平均熒光強度得到的差值，再除以兩倍的陰性區域標準差獲得。

5、激光束

表示流式細胞檢測中常用的激光束。

6、通用檢測通道

表示能夠生成最佳成像結果的標準顯微鏡濾光片設置。

7、最大激發波長

表示獲得峰值的激發波長。

8、最大發射波長

表示獲得峰值的發射波長。