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  • 發布時間:2023-05-06 19:50 原文鏈接: 南非葉的繁殖方式

      外植體采集:選取生長健壯、無病蟲害的優良植株,剪取木質化程度較輕的當年生嫩枝為外植體;

      外植體消毒:將采回的莖段截成長1.2-1.5厘米的帶節小段,剪去葉片,只保留葉柄基部(長約0.5厘米),流水沖洗20分鐘備用;在超凈工作臺上,用75%酒精浸泡10秒,0.1%升汞振蕩消毒8分鐘,再用無菌水沖洗5次洗去殘留藥液,用無菌濾紙吸干水分后,切去莖段兩端和葉柄上部少許(保留長度約0.2厘米),備用;

      初代培養:即誘導無菌芽,在超凈工作臺上將外植體消毒得到的外植體莖段接種于誘導培養基上,誘導培養基為MS基本培養基附加6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)0.5毫克/升和萘乙酸(NAA)0.05毫克/升,即MS+6-BA0.5毫克/升+NAA0.05毫克/升,蔗糖和瓊脂粉添加量分別為每升培養基30克、6克,滅菌前培養基pH調整為6.0,培養室溫度為(23±2)℃,光照強度1500-2500勒克斯,光照時間為12小時/天;在誘導培養基中,側芽易于誘導且生長迅速,誘導率可達70%,以春夏季消毒效果更佳;初代培養3周時,側芽可高達3-4厘米,具3張以上葉片,可轉入繼代培養基進行繼代培養;

      繼代培養:待無菌芽生長至3-4厘米時,將其分段切割,逐段轉入繼代培養基進行培養,每3周左右繼代轉接一次;培養室光照時間為16小時/天,其他培養條件同初代培養;光照強度為1500-2500勒克斯時,光照時間16小時;繼代培養基為MS-z+6-BA0.2毫克/升+IBA0.05毫克/升+PP3330.05毫克/升,所述的MS-z培養基每升中所含的組分及濃度(毫克/升)如下:

      大量元素:硝酸鉀1900、硝酸銨412.5、二水氯化鈣880、七水硫酸鎂370、磷酸二氫鉀170、七水硫酸亞鐵27.8、乙二胺四乙酸二鈉37.3;

      微量元素:四水硫酸錳22.3、七水硫酸鋅8.6、硼酸3.1、二水鉬酸鈉0.25、碘化鉀0.83、五水硫酸銅0.025、六水氯化鈷0.025;

      有機物:肌醇100.0、甘氨酸2.0、鹽酸吡哆醇(VB6)0.5、煙酸0.5、鹽酸硫胺素(VB1)0.1;

      其它:瓊脂8000、蔗糖40000、pH6.0;

      生根培養:選取葉片數4片以上、高度2厘米以上的試管苗轉入生根培養基進行培養。生根培養基選用1/2MS作為基本培養基(僅大量元素減半),附加吲哚丁酸IBA0.1毫克/升,即1/2MS+IBA0.1。光照時間為每天16小時,以促使植株健壯。生根培養2周時,生根率可達100%,株高5厘米左右,植株生長健壯,根系發達。

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