取芹菜葉柄,用解剖刀或刀片切成小段,并將所要切的面削平.然后取鋒利的剃刀或新的刀片,進行徒手切片.將切下的切片自切片刀上移到盛有水的培養皿中,也可以直接放在載玻片上的水滴中,加蓋玻片即可進行觀察。
芹菜葉柄中的薄壁組織細胞體積比其它細胞大,細胞壁薄,并有發達的細胞間隙.由于新鮮材料中細胞間隙內充滿空氣,因此在顯微鏡下觀察時,常呈黑色.這些細胞一般為等直徑多面體(十四面體).由于徒手切片較厚,在切片上可以看到這些細胞的立體形狀。
為了觀察清楚,可以染色.常用的染料有1%亞甲基藍、0.5—1%中性紅或1%番紅水溶液.染色的切片可放在10%甘油中,方法是將染好的切片周圍的水分用吸水紙吸去,然后加1—2滴10%甘油,加蓋玻片后即可觀察.甘油能增加透明度和防止切片失水變干,因此可保存較長時間.但甘油一定是中性的,否則會使切片退色。
在芹菜葉柄的橫切面上,還可看到分布在葉柄外圍突起的棱角處的厚角組織.厚角組織細胞可以根據下面兩個特征識別出:一是它們的細胞具有珠光壁,在顯微鏡下很易與其它細胞區別;另一特點是細胞壁在角偶處加厚,看起來很象一星芒狀結構.其中灰暗色的“洞穴”是細胞腔,里面充滿原生質體.隨后換高倍物鏡觀察其細胞結構.觀察后再用間苯三酚和鹽酸處理切片,處理時先用鑷子取下蓋玻片,加一滴1mol/L鹽酸,過1—2分鐘再加一滴間苯三酚,蓋上蓋玻片,用吸水紙吸去多余液體后,即可在顯微鏡下觀察.看不到有顏色反應時,說明它們的細胞壁雖然加厚,但未木質化。