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  • 發布時間:2021-05-12 16:16 原文鏈接: 原位PCR實驗的大致過程

      大致過程

      實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等。其基本方法為多聚甲醛固定組織或細胞,蛋白酶消化處理組織;在組織細胞片上滴加PCR反應液進行擴增,覆蓋并加液體石蠟后,在原位PCR儀上進行PCR循環擴增,PCR擴增結束后用標記的探針進行原位雜交,最后顯微鏡觀察結果。

      實驗玻片的處理

      清潔液清洗→自來水沖,烘干→強酸24h→自來水,蒸餾水洗,烘干95%乙醇數小時→烘干,高壓消毒。再用多聚賴氨酸APES(3-氨丙基三乙氧硅烷)包被。

      固定液的選擇標準:保持組織結構,最大限度地保持細胞內DNA或RNA水平,使引物和探針更易于進入細胞內,在規定的時間內進行反應。

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