(1)翻譯起始因子IF3結合到小亞基的E位點,同時也橫跨至P位點;(這一過程在起始之初就已經完成)起始因子IF1結合至A位點;
(2)起始因子IF2·GTP被IF3和IF1招募至P位點;
(3)起始fMet·tRNA一方面被mRNA起始密碼子AUG招募,另一方面被已經結合到P位點的IF2·GTP招募,進一步結合到P位點,這一過程伴隨著核糖體小亞基通過mRNA上的核糖體結合位點序列(RBS)識別結合到mRNA上;
(4)當tRNA和mRNA配對后,起始因子IF3穩定性降低;
(5)IF2·GTP進一步招募大亞基;
(6)大亞基的結合催化IF2上GTP的水解,形成對P位點親和力較低的IF2·GDP,后者隨后從核糖體上脫離;
(7)由于IF2的脫離,大小亞基結合進一步緊密,置換出IF3和IF1,形成了起始狀態的核糖體復合物。
注:實驗分析表明,當IF3和IF1不存在時,起始tRNA傾向于在IF2之前結合至P位點,提示起始tRNA可以直接被起始密碼子招募;當IF3和IF1存在時,起始tRNA傾向于在IF2之后結合P位點,提示IF2可以被IF3和IF1有力招募,而tRNA也可以進一步被IF2招募。