反相色譜分離純化后怎樣除去流動相產品中的TFA和乙腈...

反相色譜分離純化后怎樣除去流動相產品中的TFA和乙腈或其他雜質？

TFA是反相色譜分離中常用的添加劑。可以用凍干的辦法去除，國外許多文獻是這樣報道的。還可以試試離子交換、凝膠層析、甚至透析和超濾，其中，離子交換層析效果比較好，還可以起到濃縮樣品的作用。

首先，凍干的辦法應該可以幾乎徹底地除去TFA和乙腈，藥物實驗前最好先檢測一下凍干品中的殘留量，只要不超過允許范圍，這種辦法是最最簡單、有效的。

其次，如果你的藥物的分裝量不大的話(<100ug)，建議你用離子交換層析，最好裝一個小一點兒的柱子，讓含鹽洗脫峰的蛋白濃度達10mg/ml以上，稀釋后完全符合試驗要求。如果用分子篩，考慮稀釋，最好也先過一個離子交換。此外可以試試疏水層析。如果產品是堿的話，可能會形成TFA鹽，這樣通過上述方法就無法除去。一般可以用堿水洗，然后將產品萃取出來。或者在里面加入一定量的鹽酸，再干燥后形成鹽酸鹽。