Krause等（1980，1982）利用DCMU（敵草隆Diuron）阻斷PSII受體測的原初電子受體QA到二級電子受體QB的電子傳遞，從而阻止了因光化學反應導致的光化學淬滅，為定量研究分析葉綠素熒光與光合作用的關系提供了可能。Bradbury等（1981，1984）利用將植物葉片快速曝光于強光下（飽和光閃）的技術，定量分析了葉綠素熒光的光化淬滅和非光化淬滅。Dietz等（1985）及Schreiber等（1986）利用微弱的調制測量光技術和飽和光閃，定量確定光化淬滅和非光化淬滅，并可持續測量葉綠素熒光相對光量子產量；Genty(1989)進一步的實驗研究表明，葉綠素熒光測量可以作為一種快速非損傷的CO2同化“探針”。所有這些上世紀80年代的創造性實驗研究，奠定了葉綠素熒光技術的應用基礎，其中脈沖調制技術（PulseAmplitude Modulated technique，簡稱PAM）成為目前市場上幾乎所有葉綠素熒光測量儀器的通用技術方法。Nedbal教授與PSI公司總裁Trtilek博士等首次將PAM葉綠素熒光技術與CCD技術結合在一起，研制成功了FluorCam葉綠素熒光成像技術（Nedbal等，2000），并于1997年為美國華盛頓大學提供了第一臺商業FluorCam系統。FluorCam葉綠素熒光成像技術成為上世紀90年代葉綠素熒光技術的重要突破，使科學家們對光合作用與葉綠素熒光的研究一下子進入二維世界。
暗適應狀態下的葉片，其原初電子受體QA處于最大氧化狀態，此時我們稱PSII（光系統II）處于完全“開放”狀態。將充分暗適應后的葉片用微弱的調制測量光照射（光強約0.1 μmol m?2 s?1）后測得的葉綠素熒光為Fo（最小葉綠素熒光）；然后再用飽和光閃（強度一般為3000μmol m?2 s?1左右或者更高，持續時間小于1s）照射葉片，QA在短時間內全部還原，PSII完全“關閉”，此時測得的葉綠素熒光稱為最大葉綠素熒光Fm，Fm與Fo之差為Fv，Fv/Fm即為PSII光化學反應的最大光量子效率。Fv/Fm可作為監測植物受脅迫的簡單快速的方法，正常高等植物葉片的Fv/Fm值約為0.83-0.84。