動物組織
碳酸銨緩沖液PMSF
離心機
1將從結腸上刮下來的黏膜放人5倍體積的碳酸鹽緩沖液(pH9.2,含抑胃肽酶和PMSF)中,使用Ultra-Turrex勻漿器勻漿。
②10000g離心20min,除去組織碎片。
③逐滴加入lmol/LHCl(約需100ml),緩慢(大于2h)調上清液的PH值至4.5,并不斷攪動。使黏蛋白形成絮狀沉淀。
④4℃:條件下10000g離心20min,以除去沉淀。上清液為粗提液,可以作為純化方案的原始材料。