固相萃取知識點介紹

　　一.固相萃取介紹：

　　固相萃取(Solid Phase Extraction，簡稱SPE)是從20世紀80年代中期開始發展起來的一種樣品前處理技術。它是通過固體吸附劑的選擇性吸附和洗脫將液體樣品(固體樣品也可制成液體樣品)中的目標化合物與干擾化合物分離，以達到富集、分離凈化樣品的目的。SPE是一個包括液相和固相的物理萃取過程，在固相萃取過程中，吸附劑對目標化合物的吸附力大于樣品母液，當樣品通過 SPE柱時，目標化合物被吸附在固體表面，其他組分則隨樣品母液通過柱子，之后再用適當的溶劑將目標化合物洗脫并收集，然后進行色譜分析。

　　二.固相萃取的主要影響：

　　固相萃取是一個目標物在固定相上吸附、解吸附/洗脫的過程，因此影響吸附、解吸附/洗脫的因素都會直接影響萃取的效率，如填料類型、洗脫溶劑的強度、 PH、流速等。

　　1.填料：填料是固相萃取技術的核心，選擇對目標物具有適中吸附性的 SPE柱填料是確保檢測準確的前提。當然針對同一種目標物，我們可以選擇不同的柱料，但是要注意方法的調整。

　　2.洗脫溶劑的強度：固相萃取是固定相-填料與流動相-上樣溶劑/洗脫溶劑對目標物的競爭吸附作用，所以在上樣時，要選擇有機溶劑含量或pH都合適的上樣液，以避免目標物在上樣時漏掉:而在洗脫時，也必須選擇適合的洗脫溶劑度，即有機溶劑的含量或pH，以確保能將吸附在填料上的目標物徹底洗脫下來。

　　3.PH：對于離子交換固定相，被分析成分與干擾物質的pKa(等電點)各不相同。通過調節溶劑pH的大小，可以使固定相帶電荷，被分析物帶相反電荷，而使干擾物質不帶申荷:或使固定相帶申荷，干擾物質帶相反申荷，而使被分析物不帶電荷。

　　4. 流速：上樣流速和洗脫流速會影響吸附或解吸附/洗脫的效果，上樣和洗脫的流速一般控制在1mL/min以內。對于大樣量痕量樣品的富集，如環境水樣中有機物的富集，上樣流速不超過5mL/min。除了以上的幾個因素，一些操作步驟完成的情況，如活化的程度、淋洗步驟的抽干等，也會影響結果的回收率或重現。

　　三. 固相萃取種類及特點：

　　固相萃取實質上是一種液相色譜分離，按照萃取機理的不同，固相萃取可分為正相(吸附劑極性大于洗脫液極性)、反相(吸附劑極性小于洗脫液極性)和離子交換吸附。正相固相萃取所用的吸附劑都是極性的，用來萃取(保留)極性物質可以從非極性溶劑樣品中吸附極性化合物；反相固相萃取所用的吸附劑通常是非極性的或極性較弱的，所萃取的目標化合物通常是中等極性到非極性化合物:離子交換周相萃取所用的吸附劑是帶有申荷的離子交換樹脂，所萃取的目標化合物是帶有申荷的化合物。隨著人們對周相萃取原理的熟悉，以及對固相萃取操作的熟練，填料越來越成為固相萃取的核心。填料不同，萃取的特點和應用也不同按照填料種類的不同，周相萃取可以分為以下四類。

　　1. 鍵合硅膠鍵合硅膠是SPE中較為常用的吸附劑，所謂鍵合硅膠就是在硅膠表面的硅醇基團上鍵合不同的官能團，其pH適用范圍為2-8。鍵合硅膠基質的填料種類較多，具有選擇性多的優點。主要的代表產品有C18(封端)、C18(未封端)、C8CNNH2PSASAX COOHPRSSCX Silica、Diol等。

　　2. 高分子聚合物上世紀90年代末，為擴大反相固相萃取材料的適用范圍，改善吸附平衡性，提高重現性，以極性官能化言分子樹脂為主體的新型反相固相萃取材料問世。此填料是以乙烯吡咯烷酮和二乙烯苯萃共聚得到的高分子聚合物，由于吡咯烷酮極性官能團的引入，這類萃取柱對各類極性、非極性化合物具有均衡的吸附作用。該類材料的使用克服了傳統C18柱存在的缺點，如小柱跑干，不浸潤，不吸附，并且活化過程中需要仔細控制:對極性化合物保留不足或不保留!對堿性化合物回收率差(強硅羥基相互作用)；回收率低、重現性差等。此類材料的代表產品有PEP、PAX PCXPS HXN其中PCX小柱可以用在不同食品中三聚氰胺的檢測前處理，可以凈化樣品中的三聚氰胺,排除其他雜質的干擾，在三聚氰胺的色譜法檢測中發揮了巨大的作用；不但保證了檢測的準確性，而且有助于提高色譜柱的使用壽命。

　　3. 吸附型填料此類產品均為無機吸附型材料，其主要是通過表面吸附作用達到提純的目的。此類材料的代表產品有Florisil(硅酸鎂)，PestiCarb(石墨化碳碳黑)，氧化鋁(Alumina-N、中性，Alumina-A、酸性，Alumina-B、堿性)， PestiCarbNH2。其中 Florisil、PestiCarb常用于去除農產品中的色素，而氧化鋁的典型應用有蘇丹紅、孔雀石綠的檢測

　　4. 混合型及專用柱系列隨著樣品基質越來越復雜，以及SPE技術及材料的日趨完善，艾杰爾開發了一系列的復合柱和專用柱，如PestiCarb/NH2復合柱(用于農藥多殘留的檢測)、DNPH-Silica(用于空氣醛酮類化合物檢測專用柱)、 SUL-5(磺胺專用柱)、HXN(磺酰脲類除草劑專用柱)等。