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  • 發布時間:2008-10-20 21:08 原文鏈接: 基因工程耐熱堿性磷酸酯酶的表達與分離純化

    摘 要 目的 獲得可用于探針的非放射性標記的耐熱堿性磷酸酯酶。方法 把耐熱堿性磷酸酯酶的基因克隆入質粒pJLA503 上,在E. coli Mph44 中表達。表達的酶用聚乙烯亞胺沉淀核酸,熱變性,硫酸銨沉淀,層析等方法純化。結果 經表達純化后每克細菌可獲得1. 5mg 的酶,酶的純度為90 % ,比活為78. 4U/ mg。結論 耐熱堿性磷酸酯酶可在E. coli Mph44 中表達,表達的酶可用熱變性和其它蛋白質純化方法來純化。
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