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  • 發布時間:2022-06-08 14:56 原文鏈接: 基因編輯的執行手段

    1)基因敲除:如果想使某個基因的功能喪失,可以在這個基因上產生DSB,非同源末端連接(NHEJ)修復的過程中往往會產生DNA的插入或刪除(indel),造成移碼突變,從而實現基因敲除。  2)特異突變引入:如果想把某個特異的突變引入到基因組上,需要通過同源重組來實現,這時候要提供一個含有特異突變同源模版。正常情況下同源重組效率非常低,而在這個位點產生DSB會極大的提高重組效率,從而實現特異突變的引入。  3)定點轉基因:與特異突變引入的原理一樣,在同源模版中間加入一個轉基因,這個轉基因在DSB修復過程中會被拷貝到基因組中,從而實現定點轉基因。通過定點轉基因的方法可以把基因插入到人的基因組AAVS1位點,這個位點是一個開放位點,支持轉基因長期穩定的表達,破壞這個位點對細胞沒有不良影響,因此被廣泛利用。

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