我們克隆基因的時候,往往可以通過一些途徑(如pcr,EST庫或者文庫篩選)得到基因的部分片段。然后通過3'race 和 5'race 方法往兩端延伸。有時會出現無法延伸的狀況,如果你超作沒有失誤的話,這時候很有可能是你模板GC含量過高的緣故,普通pcr 是沒有辦法延伸的,可以用擴高gc 含量模板的Taq酶和BUffer就可以成功。這是我克隆基因中獲得的經驗。