復方利福平片中異煙肼和吡嗪酰胺的含量測定方法

復方利福平片中異煙肼和吡嗪酰胺的含量測定方法

毛細管氣相色譜法測異煙肼和吡嗪酰胺的含量

(南京科捷分析研究所)

目的：建立復方利福平片中異煙肼和吡嗪酰胺的含量測定方法。

方法：毛細管氣相色譜法，以乙酰苯胺為內標，色譜柱為彈性石英毛細管柱25m×0.32mm×0.52μm(DB-1)柱溫170℃;氣化室溫度250℃;檢測器溫度250℃;載氣為高純氮。

結果：異煙肼和吡嗪酰胺的線性范圍分別是0.426～2.13mg/ml和1.23～6.13mg/ml;平均回收率分別為99.81%和99.63%。

結論：方法簡便，快速，準確，可作為該制劑的檢測方法。
關鍵詞　毛細管氣相色譜法；異煙肼；吡嗪酰胺；含量測定

　　復方利福平片含利福平、異煙肼和吡嗪酰胺三主藥，臨床主要應用于治療結核病，目前，國內市場為進口制劑。關于該進口制劑中各組分的含量測定方法，文獻報道有紫外分光光度法^［1］和液相色譜法^［2］，本文采用毛細管氣相色譜法建立了國產仿制藥復方利福平片中異煙肼和吡嗪酰胺的含量測定方法。

1　儀器、藥品和試劑
　    南京科捷分析儀器有限公司的GC5890氣相色譜儀，毛細管進樣系統，氫火焰離子化檢測器。
　　異煙肼，吡嗪酰胺和利福平原料藥，對照品(中國藥品生物制品檢定所)，內標：乙酰苯胺為分析純。

2　方法和結果
2.1　色譜條件
　　色譜柱：彈性石英毛細管柱25m×0.32mm×0.52μm(DB-1)。
　　色譜條件：柱溫170℃;氣化室溫度250℃;檢測器溫度250℃;載氣為高純氮，柱前壓0.6MPa;分流進樣，分流比為40∶1。
2.2　干擾試驗
　　按處方比配制異煙肼和吡嗪酰胺乙酸乙酯溶液1份，另取利福平及空白輔料乙酸乙酯溶液一份，分別取1～3μl注入氣相色譜儀，利福平和空白輔料對異煙肼和吡嗪酰胺測定無干擾。
2.3　標準曲線的制備
　　取乙酰苯胺適量，加乙酸乙酯溶解并稀釋成每1ml中含6mg的溶液，搖勻，作為內標溶液，備用。另取異煙肼對照品和吡嗪酰胺對照品適量，置100ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋成每1ml中含異煙肼4mg,吡嗪酰胺12mg的對照品貯備液，另取上述貯備液1.0,2.0,3,0,4.0和5.0ml,置10ml量瓶中，加入內標溶液2.0ml,用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，放置，取2μl注入氣相色譜儀，以對照品與內標的濃度比作為橫坐標，峰面積比為縱坐標，進行回歸分析，得回歸方程異煙肼為:Y=-0.2008X+0.5236,r=0.9992,線性范圍為0.426～2.13mg/ml；吡嗪酰胺為:Y=-0.0815X+0.6134,r=0.9998,線性范圍為1.23～6.13mg/ml。
2.4　回收率試驗
　　量取2.3項下對照品貯備液1.5,2.0,2.5,3.0和3.5ml,置10ml量瓶中，加入內標溶液2ml,再加入按處方配比的利福平及空白輔料，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，取上清液2μl注入氣相色譜儀，按回歸方程計算回收率，結果見表1，2。

表1　吡嗪酰胺回收率試驗結果

毛細管氣相色譜法測異煙肼和吡嗪酰胺的含量

氣相色譜儀---南京科捷分析研究所

復方利福平片中異煙肼和吡嗪酰胺的含量測定方法