4氨基-6-氯苯-1,3-二磺酰胺照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取本品10片,精密稱定,研細,精密稱取適量[約相當于鹽酸阿米洛利(按C6H8CN2O·HCl計)5mg],置50ml量瓶中,加甲醇15ml與0.1mol/L鹽酸溶液2m,超聲使鹽酸阿米洛利與氫氯噻嗪溶解,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續濾液對照溶液精密量取供試品溶液1ml,置100m量瓶中用流動相稀釋至刻度,搖勻系統適用性溶液取4-氨基-6-氯苯-1,3-二磺酰胺、氫氯噻嗪對照品與鹽酸阿米洛利對照品,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中各含0.1mg的溶液色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀13.6g,加水8ml溶解后,用磷酸調節pH值至3.0,用水稀釋至100ml)-甲醇-水(4:25:71)為流動相;檢測波長為265nm;進樣體積20l。系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,理論板數按氫氯噻嗪峰計算不低于1500,4-氨基-6-氯苯-1,3-二磺酰胺峰、氫氯噻嗪峰與阿米洺利峰之間的分離度均應符合要求測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有與系統適用性溶液中4氨基-6-氯苯-1,3-二磺酰胺峰保留時間一致的峰,其峰面積不得大于對照溶液中氫氯噻嗪峰面積(1.0%)。含量均勻度取本品1片,置25ml量瓶中,加甲醇7.5ml與0.1mol/L鹽酸溶液1ml,照含量測定項下的方法,自“超聲使鹽酸阿米洛利與氫氯噻嗪溶解”起,依法測定,應符合規定(通則0941)。溶出度照溶出度與釋放度測定法(通則0931第一法)測定溶出條件以0.1mol/L鹽酸溶液900m為溶出介質,轉速為每分鐘100轉,依法操作,經30分鐘時,取溶出液20ml濾過,取續濾液備用鹽酸阿米洛利供試品溶液取上述續濾液對照品溶液取鹽酸阿米洛利對照品,精密稱定,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1m中約含2.5g的溶液。測定法取供試品溶液與對照品溶液,照紫外可見分光光度法(通則0401),在365nm波長處分別測定吸光度,計算每片的溶出量。限度標示量的80%,應符合規定。氫氯噻嗪供試品溶液精密量取上述續濾液5m,置50ml量瓶中,用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻對照品溶液取氫氯噻嗪對照品,精密稱定,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含2.5μg的溶液。測定法取供試品溶液與對照品溶液,照紫外-可見分光光度法(通則0401),在272nm波長處分別測定吸光度,計算每片的溶出量限度標示量的80%,應符合規定。其他應符合片劑項下有關的各項規定(通則0101)。
