1、取外周靜脈血，用肝素抗凝，加等量的Hank’s液并混勻。
2、將分層液加入試管中，用量約為血量的1/2。用吸管沿管壁緩緩將血加入分層液面上。
3、置于水平離心機離心，1500r/min，10min。可見絕大多數單個核細胞懸浮于血漿和分層液的界面，呈白膜狀。
4、用尖吸管吸取界面的細胞層，置于另一試管中，加入適量的Hank's液，混勻后以1000r/min，離心10min，棄上清。
5、同法洗滌細胞2次。
6、將細胞重懸于RPMI-1640培養液中，4℃保存備用。
