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  • 發布時間:2019-04-05 22:27 原文鏈接: 多克隆抗體提取實驗——批量提取法

    由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。主要用于(1)批量提取多個抗體(2)為進一步驗證抗體的作用進行基礎操作。

    實驗方法原理由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一類抗原決定簇,也可刺激機體產生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。
    實驗材料

    血清

    試劑、試劑盒

    DEAE纖維素磷酸鹽緩沖液

    儀器、耗材

    燒杯布氏濾斗濾紙

    實驗步驟

    1.  稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50 g,置于1 000 ml燒杯中,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒,再經酸堿處理后,用0.01~0.05 mol/L,pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡。

    2.  將水分抽干,或用布氏濾斗(內放兩層濾紙)過濾,收集濕纖維素,以降低其離子強度。按1 ml血清加濕重5 g DEAE纖維素,經過充分攪拌,置4℃吸附1 h。上清液可再如此處理一次,即獲得較純的IgG。

    注意事項

    準備前需要配好磷酸鹽緩沖液, 并測定其PH值。


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