大腸稈菌感受態細胞的制備

實驗材料 大腸桿菌

試劑、試劑盒 CaCl2水

儀器、耗材 震蕩儀三角瓶試管離心管離心機

實驗步驟

1、取1%大腸桿菌E.coli接種于含2 ml LB培養基的試管中，37 ℃振蕩培養過夜。

2、取0.1ml過夜培養物轉種于含10 ml LB培養基的三角瓶中，37 ℃振蕩培養3h至OD600=0.3。

3、然后把培養物倒入1.5 ml離心管中，冰浴10min。

4、在4 ℃下以4000 rpm離心5min，去上清液。

5、把菌體懸浮于15 ml冰冷的0.1M CaCl2溶液中，置冰上30min

6、然后再在4 ℃下以4000 rpm離心10min，去上清液。

7、將菌體懸浮于0.1 ml CaCl2溶液中，冰浴放置4-12hr備用。

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