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  • 發布時間:2017-01-06 11:55 原文鏈接: 天津工生所酵母轉錄單元高效組裝整合技術獲進展

      釀酒酵母廣泛應用于能源燃料、化學品和天然化合物等的合成生產。開發簡易高效的,能夠在酵母染色體上組裝整合大量轉錄單位的技術方法,實現復雜異源代謝途徑在酵母中的組裝與表達,是酵母合成生物學與代謝工程研究的熱點。

      中國科學院天津工業生物技術研究所微生物與合成生物學研究團隊和新酶設計與酵母基因組工程研究團隊合作,利用二型S內切酶組裝方法優勢,以及酵母自身的高效同源重組效率,經模塊化設計建立了一套DNA組裝和染色體整合方法,并命名為模塊化兩步組裝(Modularized two-step,M2S)技術。通過該技術,可以在5天內整合完成由4個轉錄單元組成的β-胡蘿卜素生物合成途徑,并能整合出包含10個轉錄單元的合成途徑,充分證明了M2S技術的快速高效性。

      研究結果表明,基于該技術,在酵母體外完成大部分轉錄單元組裝后,在酵母體內進行同源整合的DNA片段數目明顯減少,裝配效率顯著提高,錯配率顯著降低,因此能夠實現更多DNA片段的同步組裝。該技術極大地簡化了在酵母細胞中組裝整合轉錄單元的現有方法,避免了頻繁的組裝策略設計和引物合成,為實現菌種定制的高通量、自動化和工業化提供了一種有效的手段。

      該研究得到科技部“863”計劃、天津市重點專項和“中科院-諾和諾德”合作研發項目的支持,相關成果在Biotechnology for Biofuels發表。天津工生所科研助理李斯微為論文第一作者。

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