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  • 發布時間:2021-06-02 19:38 原文鏈接: 如何促進4T1小鼠乳腺癌細胞貼壁

    如何促進4T1小鼠乳腺癌細胞貼壁

    • 1. 適度消化細胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養基打散。

    • 2. 用塑料瓶培養,如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養瓶,或者用鹽酸對培養瓶進行蝕刻,或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA,也可以幫助細胞貼附新的培養瓶,細胞不易貼壁,建議加多聚賴氨酸處理。

    • 3. 正確配制消化液或培養液。

    • 4. 使用合適的細胞外基質或貼壁試劑。

    • 5. 復蘇新的細胞,D一周用20%血清幫助細胞復原。

    • 6. 傳代接種一定要鋪的均勻,避免細胞抱團生長。

    • 7. 細胞傳代24小時之內,不要晃動,以免影響貼壁。

    • 8. 體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜上,因此培養在有膠原的底物上有利于生長。人或小鼠表皮細胞培養,可以用γ射線照射后的3T3細胞為飼養層,另外降低pH、Ca2+含量和溫度,均有利于上皮細胞生長。

     




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