以蘆丁為例，其他物質測定方式雷同
儀器與試劑
1．儀器紫外-可見分光光度計；量瓶、移液管、吸量管。
2．試劑亞硝酸鈉，硝酸鋁，氫氧化鈉，乙醇(均為分析純)，5％亞硝酸鈉溶液，10％硝酸鋁溶液，1mol／L氫氧化鈉溶液，30％乙醇溶液，蘆丁對照品，蘆丁(原料藥)。
實驗內容與步驟
1．對照品溶液的制備精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品100mg，置100mL量瓶中，加甲醇70mL，置水浴上微熱使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。精密吸取10mL，置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得(每1mL中含無水蘆丁0．1mg)。
2．標準曲線的制備精密量取對照品溶液(o．1mg／ml)o．0mL、1．0mL、2．0mL、3．0mL、4．0mL、5．0mL，分別置于10mL量瓶中，各加30％乙醇使成5．0mL，各精密加入5％亞硝酸鈉溶液0．3mL，充分搖勻，放置6分鐘。各精密加入10％硝酸鋁溶液0．3mL，充分搖勻，放置6分鐘。各加1lmol／L氫氧化鈉溶液4．0mL，用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻，放置15分鐘，用分光光度計，在510nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
3．試樣測定精密量取蘆丁試樣溶液(0．1mg／ml)3.0mL，置10mL量瓶中，按標準曲線制備項下自“各加30％乙醇使成5．0ml。“起依法操作直至測定出樣品的吸光度。
數據處理
1．根據測得的對照品的數據，繪制A—C標準曲線或計算回歸方程。
2．根據測得的試樣的數據，從標準曲線上讀出或由回歸方程計算出試樣溶液中蘆丁的重量(rag)，按下式計算：