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  • 發布時間:2021-12-26 17:43 原文鏈接: 如何預防微生物菌種衰退

      采用已衰退菌種進行生產會影響生產效率,而把已衰退菌種作為陽性菌株進行檢驗,則會影響檢驗正確率。既然變異是不可避免的,那么我們應該如果避免菌種衰退呢?

      1、控制傳代次數

      盡量避免不必要的移種和傳代,把必要的傳代減少到最低的水平以減少突變幾率。傳代次數越多,產生突變的幾率就越大,菌種發生衰退的機會就越高。在實驗室檢驗或者是生產實際中,應嚴格控制傳代次數。中國藥典當中規定,培養基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數不得超過5代,以防止菌株因傳代次數過多引起衰退影響檢驗。

      2、利用不同類型細胞進行接種傳代

      放線菌,霉菌用菌絲進行移種比分生孢子容易衰退,因菌絲是對核且有異核存在,所以移種霉菌適宜采用孢子。

      3、良好的培養條件

      不良的培養條件會衰退細胞的出現,因此采用適宜的培養基進行菌種培養,以減少衰退幾率

      4、采用有效的菌種保藏方法

      根據保存時間的長短,選擇適宜的保存方法。

      傳代培養法:復蘇后的第一代放于4℃冰箱或室溫保存,定期傳代培養。保藏時間依微生物種類而定。如,芽孢、霉菌、酵母菌保存6個月轉一次,普通細菌1個月轉一次,假單胞菌2周轉一次。

      甘油凍存法:將復活后經過性能確認的菌株新鮮培養物(一般是第二代菌株),用0.85%的滅菌生理鹽水(約1-2mL)洗斜面菌苔成菌懸液;將上述菌懸液吸取適量于滅菌管(凍存管)中(如,滅菌管容量為5ml,則取1.5mL菌液),加入等體積的40%滅菌甘油,混勻,密封。保藏溫度為—20℃,一般可保存1-2年。

      瓷珠保存管保存:菌株保藏管內含特制的小珠(20-25顆)和特殊溶液,只需將培養好的菌株接入溶液中,搖勻成菌懸液,細胞即吸附于小珠上,然后吸出溶液,將保藏管置-70℃可保存5年,置-20℃可保存2-3年。


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